选修3现代生物科技专题（2005年6月第1版）《第二节基因工程的原理和技术》优质课教案下载

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（2）过程与方法：

模拟形成重组DNA分子的过程

（3）情感态度与价值观：

通过引导学生的自主探究活动，引导学生主动参与，乐于探究，培养学生收集和处理科学信息的能力、获取新知识的能力、分析和解决问题的能力及交流与合作的能力

二、教学重难点

（1）教学重点：基因表达载体的构建

（2）教学难点：限制酶的选择

三、教学过程

师：请大家回顾一下基因工程的一般操作步骤有哪些？

生：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入到受体细胞、目的基因的检测和筛选。

师：那么其中核心步骤是什么？

生：基因表达载体的构建。

师：今天这一节课我们就一起来探索一下这个制备过程。你认为要想制备重组DNA分子，需要用到哪些工具酶？

生：限制酶、DNA连接酶。

师：那这些工具酶是如何来制备重组质粒的呢？

活动一、一种限制酶切割

用白色纸环代表质粒，红色纸条代表含有目的基因的 DNA 分子，剪刀代表限制酶，胶带代表DNA 连接酶，现在用酶Ⅰ切割目的基因和质粒，再用DNA连接酶，看看可以得到哪些连接产物？

师：老师也制作了部分连接产物，我们一起来看看。

质粒自身环化 目的基因自身环化

质粒-质粒连接物 目的基因-目的基因连接物

质粒-目的基因正向连接 质粒-目的基因反向连接

师：因为用一种限制酶进行切割，产生的黏性末端是一样的，可以进行首尾相连，称为自身环化。也会出现质粒和质粒，目的基因和目的基因的相连，而且重组质粒还出现了两种，大家看看这两种有什么区别没有？

生：一个正的，一个倒的。

师：如果重组质粒中转录的模板链是上面一条链，左图的目的基因得到的mRNA序列为AUG...，AUG是起始密码子，与核糖体结合完成翻译可以产生我们需要的目的基因产物，称为目的基因和质粒的正向连接；右图目的基因转录形成的mRNA序列为UUA...，UUA不是起始密码子，不能与核糖体结合完成正常的翻译，被称为目的基因和质粒的反向连接。但其实我们想要的是哪种连接产物？

生：质粒-目的基因正向连接。