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《课题1DNA的粗提取与鉴定》公开课教案优质课下载
3、是否容易提取DNA( 植 / 动 )?
4、为什么不用哺乳动物的成熟红细胞?
二、DNA的释放
1、怎样使鱼白细胞破裂?原理是什么?
2、如果实验材料是植物细胞又该如何处理?
3、洗涤剂和食盐的作用分别是什么?
4、提取鱼白DNA时,进行充分的机械性搅拌。如果研磨不充分,会对实验结果产生怎样的影响?
三、DNA的粗提取
1、获得的滤液中可能含有哪些细胞成分?
2、为了纯化提取的DNA需要将滤液作怎样的进一步处理?
3、提取含杂质较少的DNA可以用什么溶液?
4、纯的DNA应该是什么颜色?
四、DNA 的鉴定
试剂: 条件:
现象:
【实验原理】
原料制备原理
鱼白细胞的细胞核中含有DNA,为了使DNA能从细胞核中释放出来,向鱼白细胞中加入大量蒸馏水。蒸馏水对于鱼白细胞是一种低渗液(利用渗透原理),水分渗透进入细胞,并且因不断吸水而使得细胞最终破裂;同时进行机械性搅拌,可加速细胞核膜的破裂,释放出大量DNA。从而制得含有大量DNA的鱼白浆状液。
DNA粗提取原理
DNA在氯化钠溶液中的溶解度,随着氯化钠溶液浓度的变化而改变。向含有DNA的浓度较高的氯化钠溶液浓度(2mol/L)中加入大量(约300mL)蒸馏水,稀释氯化钠溶液浓度为0.14mol/L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出。加上不停地搅拌,就可以获取含DNA的粘稠物了。
DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一
步提取出含杂质较少的DNA。
DNA鉴定原理
本实验采用二苯胺鉴定法, DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为
鉴定DNA的试剂。鉴定时溶液蓝色的深浅,与溶液中DNA含量的多少有关。