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师梦圆高中生物教材同步人教版选修1 生物技术实践课题3 血红蛋白的提取和分离下载详情
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选修1生物技术实践《课题3血红蛋白的提取和分离》公开课教案优质课下载

2、提取和分离蛋白质的方法有哪些?

3、凝胶色谱法的概念?原理?分离蛋白质的过程?

4、凝胶指的是什么?

5、电泳的概念?原理?作用?常用方法?

6、缓冲溶液的作用?配制方法?

授课:

基础知识:

(一)蛋白质分离和提取的依据------蛋白质各种特性的差异

如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力,等等,可以用来分离不同种类的蛋白质

(二)分离和提取蛋白质的方法

凝胶色谱法和电泳法

(三)凝胶色谱法

1.概念:也称做分配色谱法,是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。

2、凝胶:

实际上是一些微小的多孔球体 ,这些小球体大多数是由多糖类 化合物构成的,如葡聚糖或琼脂糖 。具有多孔的凝胶就叫分子筛。在小球体内部有许多贯穿的通道。

3、分离原理

凝胶是一些微小的多孔球体,在小球体内部有许多贯穿的通道:

相对分子质量较小的蛋白质由于扩散作用进入凝胶颗粒内部而被滞留;相对分子质量较大的蛋白质被排阻在凝胶颗粒外面,在颗粒之间迅速通过。

4、分离蛋白质的过程

(1)蛋白质混合物上柱

(2)洗脱开始,相对分子质量较小的蛋白质扩散进入凝胶颗粒内;相对分子质量较大的蛋白质则被排阻于颗粒之外

(3)相对分子质量较小的蛋白质被滞留,相对分子质量较大的蛋白质向下移动。

(4)相对分子质量不同的分子完全分开

(5)相对分子质量较大的蛋白质行程较短,已从层析柱中洗脱出来,相对分子质量较小的蛋白质还在行进中

5、其他用途:如测定生物大分子的分子量、蛋白质的脱盐等

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