人教2003课标版《1.1DNA重组技术的基本工具》优质课教案下载

人教2003课标版《1.1DNA重组技术的基本工具》最新教案优质课下载

学习目标：1.熟悉DNA重组的基本工具，了解限制酶、DNA连接酶的作用特点

比较各种与DNA相关的酶

2.了解基因工程的基本操作程序，理解基因表达载体的构建过程

学会在基因工程应用中解决基本操作程序的相关问题

学习重点、难点：基因工程的酶的作用特点和基因表达载体的构建

学习过程：

基因工程的基本工具

知识预习校对

考点透析：

【思考1】：从来源和作用上看，限制酶有哪些作用特点？

【思考2】：限制酶切割的磷酸二酯键具体指哪个部位？

[学生活动一]：写出BamH I (--G↓GATCC--)、Bgl II(--A↓GATCT--)和Sau3A(--↓GATC--)三种限制酶切割结果和黏性末端，并观察三者切割结果有什么特点？

【思考3】：某一种DNA连接酶作用时，对核苷酸序列有无特异性要求？

总结比较：

[学生活动二]：请写出BamH I (--G↓GATCC--)和Bgl II(--A↓GATCT--)切割后用DNA连接酶作用下，产生的重组新片段（甲）；请写出BamH I (--G↓GATCC--)和Sau3A(--↓GATC--)切割后用DNA连接酶作用下，产生的重组新片段（乙）。并思考对重组片段甲用BamH I 和Bgl II是否可以再识别切割？对重组片段乙用BamH I 和Sau3A是否可以再识别切割？

随堂及课后巩固：

1.DNA连接酶是一种能够将两条DNA链连接起来的酶，下图为四种限制酶BamHI，EcoRI，HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以用DNA连接酶连接？（ ）

　　A、 BamHI和EcoRI B、 BamHI和HindⅢ

C、 EcoRI和HindⅢ D、 BamHI和BglII

2.下列关于DNA连接酶的叙述中，正确的是 （ ）（多选）

A．DNA连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢键

B．DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和核糖

C．同一种DNA连接酶可连接不同限制酶剪切产生的黏性末端

D．DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上相邻脱氧核苷酸之间的磷酸和脱氧核糖

3.下表为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点。如下图所示，已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或Bgl II的酶切位点。现用BamHⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段(假设所用的酶均可将识别位点完全切开)，下列各种酶切位点情况中，可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是(　　)