北师大版生物选修1 生物技术实践《第1章 微生物技术 第1节 培养基对微生物的选择作用 【实验】培养基的配制和灭菌》优质课教案

北师大版生物选修1 生物技术实践《第1章 微生物技术 第1节 培养基对微生物的选择作用 【实验】培养基的配制和灭菌》优质课教案

②不同培养基还要满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

3．配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤及注意事项

(1)步骤：计算―→称量―→溶化―→灭菌―→倒平板

(2)注意事项

①倒平板的温度一般在50℃左右适宜，温度过高会烫手，过低培养基又会凝固。

②平板需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。

4．纯化大肠杆菌的操作过程及注意事项

(1)原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。

(2)方法：平板划线法、稀释涂布平板法。

①平板划线法：平板划线法中细菌的分离和稀释过程发生在接种环在固体平板表面上的移动划线过程中。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成纯种的单个菌落。(如下图)

注意　a．划线时最后一区域不要与第一区域相连。

b．划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。

②稀释涂布平板法

Ⅰ.系列稀释操作(图1)

a．将分别盛有9 mL水的6支试管灭菌，并按101～106的顺序编号。

b．用移液管吸取1 mL培养的菌液，注入101倍稀释的试管中。用手指轻压移液管上的橡

皮头，吹吸3次，使菌液与水充分混匀。

c．从101倍稀释的试管中吸取1 mL稀释液，注入102倍稀释的试管中，重复b步混匀操作。以此类推，直到完成最后1支试管的稀释。

图1

注意　移液管需要经过灭菌。操作时，试管口和移液管应在离火焰1～2 cm处。

Ⅱ.涂布平板操作如图2所示：

图2