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选修1 生物技术实践《第4章 现代生物技术 第3节 聚合酶链式反应技术 【实验】DNA片段的扩增和琼脂糖凝胶电泳检测》优秀教案
技能目标
1、 理解并能够阐明PCR的工作原理
2、 掌握PCR技术的基本流程
情感、态度与价值观 通过对PCR原理的学习,培养学生严谨的科学态度和实事求是
的科研精神
教学重点:1、 理解并能够阐明PCR的工作原理
2、 掌握PCR技术的基本流程
教学难点:理解并能够阐明PCR的工作原理
教学过程:
引入新课
在现代生物技术中,DNA技术可谓是尖端技术。人类基因组计划、基因工程、基因诊断、基因检测、古生物鉴定以及刑事案件侦破都离不开对DNA分子碱基序列的分析。而分析DNA碱基序列,就需要一定量的DNA片段,但是我们却不总是能够获得足够量的目的DNA,那么我们怎样才能迅速获得足够量的DNA片段呢?今天我们来研究学习如何快速获得大量DNA分子拷贝的PCR技术原理。
进行新课
一.细胞内DNA复制条件分析:
1.细胞内DNA复制过程
(1)DNA的反向平行结构
核苷酸分子的结构与方向性
由核苷酸通过3,5-磷酸二酯键连接形成核苷酸长链
DNA双螺旋结构的反向平行结构
(2)DNA的复制过程:
解??? 旋:解旋酶、ATP,DNA两条链打开,,形成两条DNA单链。
引物结合:在DNA单链3’端与DNA反向配对结合,确保引物3’端与DNA单链准确配对。
DNA聚合酶结合:
子链合成:DNA聚合酶从引物3’端开始,将配对的脱氧核苷酸连接起来。
后续加工:DNA聚合酶I将引物切去,并合成空缺处的DNA单链,再由DNA连接酶将不连续的DNA子链连接起来(半不连续合成。先导链,滞后链)
子链合成特点:不能从头合成;合成方向为“5’→3’合成”。