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人教2003课标版《科学·技术·社会DNA指纹技术》优质课PPT课件下载
4. 第一个DNA指纹
5. DNA指纹的应用
DNA指纹的含义
DNA指纹:待测样品DNA经限制酶酶切、电泳、转膜,以重复序列中的核心序列为探针进行DNA印迹杂交所形成的具有特征性的杂交图谱。
由于DNA指纹具有完全个体特异的多态性,其个体识别能力足以与手指指纹相媲美,因而得名。
DNA指纹的含义
人类和动植物基因组中含有可变数目重复序列(VNTR序列),且广泛地分布于整个基因组中。由于这种串联重复序列的增加或丢失所造成的变异通常不会被选择,因此这些变异的积累就导致一个物种内非亲缘关系个体间基因组中存在的巨大差异。
DNA指纹的特点
1.多位点性
高分辨率的DNA指纹图谱通常由15-30条带组成,看上去就像挂号信上的条码签一样。DNA指纹区中的绝大多数区带是独立遗传的,因此一个DNA指纹探针能同时检测基因组中数十个位点的变异性。
2.简单的遗传方式
DNA是人的遗传物质,其特征是由父母遗传的。分析发现,DNA指纹图谱中几乎每一条带纹都能在其双亲之一的图谱中找到,这种带纹符合经典的孟德尔遗传规律,即双方的特征平均传递50%给子代。
DNA指纹的特点
3.高度变异性
不同的个体或群体有不同的DNA指纹图。一般选用识别4个特定碱基的内切酶来切DNA,经过电泳后,这种个体间差异性就能表现出来。
研究表明,两个随机个体具有完全相同的DNA指纹图的概率为3000亿分之一,两个同胞个体具有相同图谱的概率也仅仅为200万分之一。
DNA指纹的特点
DNA指纹图谱法操作
1.提取样品中的DNA;
2.若提取DNA 量很少,可将其进行PCR扩增,得到大量DNA。
3.选用限制性核酸内切酶,在长链DNA位置上加以切割,将分子量很大的DNA长链切成许多长度不同的小片段 。
4.在凝胶电泳仪中,对酶解完全后的DNA片段进行电泳,各酶切片段就会按其长度大小在电场中进行分离。
5.先用碱性溶液使凝胶板中分离开的双链DNA片段变性为单链片段,然后将凝胶板夹在尼龙膜中,并永久性地固定在尼龙膜上。
DNA指纹图谱法操作
6.让放射性DNA探针与尼龙膜上的单链DNA片段进行杂交。