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人教2003课标版《课题1DNA的粗提取与鉴定》公开课PPT课件优质课下载
(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液
1、动物细胞的破碎:
2、植物细胞的破碎:
以鸡血为例,在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可。
提取洋葱DNA时,在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。
加入洗涤剂和食盐的作用分别是?
如果研磨不充分,会对实验结果产生什么影响?
洗涤剂是一些离子去污剂,能溶解细胞膜,有利于DNA释放;食盐有利于DNA溶解
会使细胞核内DNA释放不完全,提取DNA量变少,影响实验结果,导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等
(三)去除滤液中的杂质
方案一:在滤液中加入NaCl,使NaCl溶液浓度为2mol/L,过滤除去不溶的杂质,再调节NaCl溶液浓度为0.14mol/L,析出DNA,过滤去除溶液中的杂质,再用2mol/L的NaCl溶解DNA。
方案二:直接在滤液中加入嫩肉粉,反应10-15min,嫩肉粉中木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。
方案三:将滤液放在60-75℃的恒温水浴中保温10-15℃,注意严格控制温度范围。
-------------浓度可使DNA溶解;
----------浓度可使DNA析出。
基础知识
一、DNA的溶解性
0
溶解度
NaCl浓度
0.14mol/L
2mol/L
2mol/L
0.14mol/L
二、酒精是一种常用有机溶剂,但------却不能溶于酒精;