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人教2003课标版《课题1DNA的粗提取与鉴定》新课标PPT课件优质课下载
选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子
2、生物大分子
主要指蛋白质、 DNA与RNA
3、提取DNA的基本思路
利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分
(一)提取DNA的方法
(1)DNA的溶解性
DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反
当氯化钠的浓度为 2 mol/L时,DNA的溶解度最大,浓度为 0.14 mol/L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理,可以使DNA在盐溶液中溶解或析出
如何通过控制NaCl溶液的浓度使DNA在盐溶液中溶解或析出?
(2)DNA在酒精溶液中的溶解性
DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精。
(3)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性
①蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响
②大多数蛋白质不能忍受60-80°C的高温,而DNA在80°C以上才会变性
③洗涤剂可以溶解细胞的细胞膜,去除脂质和蛋白质,但对DNA没有影响
1、 在沸水浴中, DNA遇二苯胺会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂
(二)DNA的鉴定
2、甲基绿 (绿色)
(一)实验材料的选取
1、材料:鱼卵、猪肝、菜花、香蕉、鸡血、哺乳动物的红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、在液体培养基中培养的大肠杆菌。(从中选取2~3种实验材料)
2、原则:选用DNA含量相对较高、容易提取的生物组织。
鸡血
3、合适的材料:
动物细胞的破碎较易,例如,在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水 ,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可