《课题3血红蛋白的提取和分离》最新PPT课件优质课下载

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蛋白质分离的原理：

根据蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等等，可以用来分离不同种类的蛋白质。

一、基础知识

（一） 凝胶色谱法

2.凝胶：

大多数凝胶是由多糖类化合物（如葡聚糖或琼脂糖）构成的多孔小球体，内部有许多贯穿的通道。

根据被分离物质的蛋白质相对分子质量的大小，利用具有网状结构的凝胶，来进行分离。

1.概念：

（分配色谱法）

3.凝胶色谱法分离蛋白质的具体过程

4.凝胶色谱法的原理

①相对分子量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢;

②相对分子量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。

相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。

进行体外实验时，如何保证蛋白质不会发生变性呢？

（二）缓冲溶液

能够抵制外界的酸和碱对溶液PH值的影响，

维持PH基本不变。

1.作用:

2.缓冲溶液的配制:

通常由1－2 种缓冲剂溶解于水

中配制而成。调节缓冲剂的使用比例就可以制得在不同PH范围内使用的缓冲液。

3. 在本课题中使用的缓冲液是:磷酸缓冲液,

成分：磷酸二氢钠与磷酸氢二钠

如何证明凝胶色谱法获得的蛋白质是目的蛋白？