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选修1生物技术实践《复习与测试》最新PPT课件优质课下载
实验原理
1. DNA和蛋白质在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。当NaCl的物质的量浓度为0.14 mol／L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。
2.DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
3.DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计
（一）实验材料的选取
材料：新鲜的鸡血
注意：
本实验中，要往鸡血中加入抗凝剂（柠檬酸钠溶液）
原则上只要含DNA的生物材料都可以，但是选取DNA含量相对较高的生物组织，成功率更大。
(1)先将新鲜的鸡血离心，获得鸡血细胞
(2)在鸡血细胞中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可
（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液
1、破碎细胞
讨论：为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？
利用了什么原理？
2、过滤，获取含DNA的滤液
讨论：为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质
答：用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通过反复溶解与析出DNA，就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质
讨论：方案二与方案三的原理有什么不同？
答：方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的DNA与蛋白质分开；方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋白质变性，与DNA分离
方案二利用了酶的专一性；方案三利用了DNA的稳定性。
（四） DNA的析出与鉴定
DNA的析出用的是与滤液体积相等的冷却的酒精溶液（体积分数为95％），静置2-3min，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水
1、DNA的析出