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选修3现代生物科技专题《1.2基因工程的基本操作程序》集体备课PPT课件优质课下载
思考：获取目的基因后，下一步该怎么做？目的是什么？
②
活动：模拟制作基因表达载体
已知限制酶EcoRI识别序列和酶切位点是
-GAATTC-。
材料：含目的基因的DNA片段（白色纸），质粒（红色纸），剪刀，胶带。
请你尝试对目的基因和载体进行剪切
活动：模拟制作基因表达载体
1.在剪切目的基因和质粒载体需注意什么？
2.在实际操作中发现，在目的基因的两端用同一种限制酶剪切后构建基因表达载体效果并不好，原因是？
是否必须用同一种限制酶？
活动：模拟制作基因表达载体
3.将切下的多个目的基因和质粒相连，连接产物有哪些（仅考虑两两相连）？
4.目的基因与质粒的连接产物只有一种吗？想一想，这种情况如果发生在细胞，是否会影响目的基因的表达？
活动：模拟制作基因表达载体
5.为了防止目的基因的环化现象，可以使用不同的限制酶进行剪切。已知SmaI识别序列和酶切位点是CCCGGG。请再次进行剪切目的基因和载体，尝试连接。
活动：模拟制作基因表达载体
启动子+目的基因+终止子+标记基因+复制原点
思考：从cDNA文库中获取的目的基因插入后就能表达吗？
启动子：（本质：DNA片段）
?位于基因的首端
?是RNA聚合酶识别和结合部位
?能驱动基因转录
终止子：（本质：DNA片段）
?位于基因的尾端