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人教2003课标版《复习与测试》精品PPT课件优质课下载
限制轮状病毒进一步感染的机制
一项新的研究发现，在感染轮状病毒后，在肠上皮细胞中发生蛋白Nlrp9b的特异性表达。Nlrp9b蛋白能够和细胞质内的轮状病毒RNA受体DHX9蛋白（RNA解旋酶）相互作用，直接结合轮状病毒，并且与衔接蛋白Asc和半胱天冬酶-1（cas-1）形成炎性小体。这一过程有两个作用，一是促进白细胞介素-18（IL-18）分泌，增强免疫细胞的作用；二是诱导小肠上皮细胞凋亡，从而限制该病毒的复制。
由于小肠上皮细胞的凋亡引发双糖水解不良，使得肠道乳糖、木糖、脂肪等因吸收障碍难以消化而被堆积在肠内，使得肠粘膜与肠腔渗透压升高，发生腹泻。
任务一：
根据上述资料，请写出Nlrp9蛋白在抗病毒感染中发挥作用的流程图。
IL-18
分泌
IL-18
B淋巴细胞
T淋巴细胞
诱导小肠上皮细胞凋亡
腹泻
蛋白质合成
任务二：
请写出研究人员运用分子生物学技术证明Nlrp9b在肠上皮细胞中特异性地表达的实验思路。
思路：（1）病毒感染小鼠；分别从小肠上皮细胞和小肠淋巴细胞提取RNA；设计DNA/RNA探针；通过核酸分子杂交，分析Nlrp9b是否转录。
（2）病毒感染感染小鼠；分别从小肠上皮细胞和小肠淋巴细胞提取RNA，在逆转录酶的作用下获得cDNA；通过测序、DNA探针杂交或基因芯片对cDNA进行检测，分析Nlrp9b是否表达及表达量。
资料：细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断基因组DNA。基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP ，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TUNEL 法检测细胞凋亡的原理。
轮状病毒的诊断
资料：儿童感染轮状病毒（RV）后，粪便中会检出轮状病毒的存在。用抗RV单克隆抗体制备的试纸可以测试儿童是否感染RV。下图是抗RV单克隆抗体制备流程示意图：
RV
注射
小鼠
B淋巴细胞
骨髓瘤细胞