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《提取和鉴定DNA》最新PPT课件优质课下载
1.思路:
利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
2.原理:
① DNA在不同浓度NaCl中溶解度不同。
DNA在0.14mol/L NaCl中溶解度最小。
②DNA不溶于乙醇,但是细胞中的某些蛋白质则可溶于其中。
⑤洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。
④DNA耐高温。大多数蛋白质不能忍受60℃~80℃的高温而发生变性,而DNA在80℃以上才会变性。
③蛋白酶能水解蛋白质,对DNA没有影响。
基本原理
方法
目的
DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,在0.14 mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低。
DNA不被蛋白酶水解
DNA耐高温
DNA对洗涤剂耐受性
DNA不溶于酒精溶液
3.方法和目的
溶于NaCl溶液中并稀释
①NaCl溶液为2 mol/L时,DNA溶解,而部分蛋白质发生盐析生成沉淀,可除去部分蛋白质及不溶于NaCl溶液的杂质。
②当NaCl溶液稀释至0.14mol/L时,DNA析出,可除去溶于NaCl溶液的部分蛋白质和杂质。
加嫩肉粉
嫩肉粉中含木瓜蛋白酶,水解蛋白质
高温
蛋白质变性