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试题内容

受损伤的马铃薯细胞内酚氧化酶(PPO)和底物(酚类物质)直接接触,引起马铃薯的褐变,为探究温度对PPO活性的影响,实验小组进行了如下实验:

(1)PPO粗提液的提取:低温下将新鲜马铃薯用蒸馏水洗净、去皮,取20 g样品放入含50 mL磷酸缓冲液(pH值为5.5)的研钵中,同时加入少量石英砂,研磨、离心后,上清液即为PPO的粗提液,加缓冲液研磨的目的是_______________。

(2)不同温度下PPO活性的测定

步骤顺序

试管1

试管2

试管3

试管4

试管5

试管6

试管7

试管8

PPO粗提液

2 mL

 

2 mL

 

2 mL

 

2 mL

 

酚类底物

 

2 mL

 

2 mL

 

2 mL

 

2 mL

反应

混合振荡

混合振荡

混合振荡

混合振荡

温度预处

理(5 min)

0 ℃

 

15 ℃

 

30 ℃

 

45 ℃

 

保温时间

5 min

5 min

5 min

5 min

记录结果

++++

++++

++

 

注:反应底物充足;实验结果中“+”越多褐色越深。

①实验步骤顺序有不妥之处,请改正_______________________________。

②实验结果表明:15 ℃和30 ℃温度条件下,PPO具有相同的活性,从酶的特性分析其原因是___________________________________________________。

③为进一步探究PPO的最适温度,应在________范围内设置温度梯度。

答案解析

【答案】

(1)维持pH,保持PPO的活性(或防止PPO失活)

(2)①“反应”步骤改在“温度预处理”步骤之后 ②在酶的最适温度前后,可以有相同的催化效率 ③15~30 ℃

【解析】

(1)过酸、过碱会使酶变性失活,所以缓冲液是为了维持pH,保证PPO的活性。

(2)①为保证酶在设定的温度下起作用,所以“反应”的步骤应改在“温度预处理”步骤之后。

②15 ℃和30 ℃温度条件下,PPO具有相同的活性,从酶的特性分析其原因是温度对酶活性的影响呈倒钟型,在酶的最适温度前后有相同的催化效率。

③由表可知在15 ℃和30 ℃时酶活性较高,因为褐色最深,所以为进一步探究PPO最适温度,应在15~30 ℃范围内设置更小的温度梯度。

所属考点

影响酶促反应速率的因素

影响酶促反应速率的因素知识点包括温度和pH对酶促反应速率的影响、底物浓度和酶浓度对酶促反应的影响、综合影响等部分,有关影响酶促反应速率的因素的详情如下:温度和pH对酶促反应速率的影响(1)分析这两个曲线图可以看出,在最适宜的温度(B)和pH(E)条件下,酶的活性最高。温度和pH偏高(BC和EF)或偏低(AB和DE),酶活性都会明显降低。(2)过酸(D)、过碱(F)或温度过高(C),都会使酶的空间结构遭到破坏,使

录入时间:2021-02-19 16:18:57
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